TRANSFERÊNCIA DE MÉTODO HPLC PARA U-HPLC DE MAIOR RESOLUÇÃO E RAPIDEZ
Resumo
A necessidade de analisar um número crescente de amostras em um pequeno intervalo de tempo vem impulsionando desenvolvimentos tecnológicos na área de instrumentação analítica para laboratório. Colunas preenchidas com partículas de tamanho pequeno (sub-2 μm) foram desenvolvidas para aplicação em análises de HPLC. O emprego de partículas pequenas nas separações cromatográficas resulta em maior eficiência, o que possibilita a redução dos tempos de análise. Este trabalho apresenta uma metodologia simples para transferir as condições cromatográficas de uma análise convencional de HPLC, para uma análise rápida de U-HPLC (Ultra High Performance Liquid Chromatography), levando em conta o tamanho da partícula, o diâmetro interno da coluna e seu comprimento. A análise por HPLC do ibuprofeno e substâncias relacionadas, segundo a Farmacopéia Européia, foi transferida para U-HPLC, com o objetivo de reduzir o tempo de análise e manter a resolução cromatográfica. Foi alcançada uma redução de oito vezes no tempo de análise, enquanto que a resolução crítica entre um par de impurezas foi mantida e o consumo de solvente foi reduzido em quatorze vezes.
Palavras-chave: U-HPLC, cromatografia a líquido de ultra-alto desempenho, conversão de método, tamanho de partícula sub-2-micra, ibuprofeno
Summary
The needs to analyze an increasingly number of samples in a short time period have been stimulating technological developments in the analytical instrumentation area. Columns packed with sub-2-micron particles have been developed to be used in HPLC analysis. Small particles provide very high efficiencies which enable very fast run times. This paper presents a practical guideline on scaling down separations by taking into account particle size, column ID, and column length. The European Pharmacopoeia (EP) HPLC method for ibuprofen and related substances was transferred to U-HPLC to reduce analysis time while maintaining chromatographic integrity. The analysis time was reduced by eight fold, resolution of a critical pair of impurities is maintained and solvent consumption was reduced by fourteen fold.
Keywords: u-hplc method conversion, ultra high performance liquid chromatography, sub-2-micron particle size, ibuprofen
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